ПРОЛИФЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ И АПОПТОЗ КЛЕТОК ЖЕЛТОГО ТЕЛА КОРОВ IN VITRO ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ТИРЕОИДНЫХ ГОРМОНОВ

Авторы: Монтвила Е. К., Митяшова О. С., Алейникова О. В., Лебедева И. Ю., Федеральный исследовательский центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста, Подольск, Россия, montvila94@bk.ru, mityashova_o@mail.ru, 68ovk@mail.ru, irledv@mail.ru


Гормоны щитовидной железы способны влиять на фолликулогенез млекопитающих путем модуляции функциональной активности фолликулярных клеток. В то же время нет никакой информации о роли тиреоидных гормонов в регуляции функции желтого тела. Поэтому целью нашей работы было изучение in vitro влияния тироксина (Т4) и трийодтиронина (Т3) в различных концентрациях на пролиферативную активность и апоптотические изменения клеток желтого тела коров. Клетки изолировали с помощью 0,5%-ной коллагеназы и культивировали в течение 7-8 сут до образования монослойных колоний в среде с сывороткой, которую затем заменяли на среду без сыворотки, содержащую Т4 (25-400 нг/мл) или Т3 (0,5-8,0 нг/мл), и инкубировали в течение 48 ч. Клетки фиксировали 2%-ным раствором параформальдегида и инкубировали с первичными мышиными антителами к ядерному антигену пролиферирующих клеток (PCNA, Dako, USA) или к проапоптотическому белку Bax (Bio-Rad, USA), а затем – со вторыми биотинилированными антителами. Для визуализации специфического связывания применяли Vectastain ABC reagent и коричневый хромофор DAB. Долю PCNA- и Вах-позитивных клеток оценивали по числу клеток, окрашенных в коричневый цвет. Обнаружено, что Т4 (50-200 нг/мл) и Т3 (1-8 нг/мл) увеличивают в 1,1-1,2 раза (p < 0,01-0,05) долю клеток, экспрессирующих PCNA, по сравнению с контрольной группой. Кроме того, повышение концентрации Т4 и Т3 в среде до 100-200 нг/мл и 1-8 нг/мл, соответственно, приводило к снижение уровня Вах-позитивных клеток в 1,1-1,4 раза (p < 0,001-0,05). Полученные данные показывают, что тироксин и трийодтиронин при физиологических концентрациях усиливают пролиферативную активность и тормозят апоптотические изменения в культуре клеток желтого тела. Таким образом, тиреоидные гормоны могут оказывать модулирующее влияние на развитие и последующую дегенерацию желтого тела коров. Работа выполнена в рамках государственного задания (тема 0445-2022-0004).