ПЕРСПЕКТИВЫ КРАТКОСРОЧНОГО ХРАНЕНИЯ СПЕРМЫ ТРУТНЕЙ МЕДОНОСНОЙ ПЧЕЛЫ

А. Н. ГУЛОВ ¹, Е. О. ЛАРЬКИНА ²

Аннотация. Сохранение спермы трутней медоносных пчел в сочетании с инструментальным осеменением пчелиных маток является эффективной стратегией для сохранения видов и их генетического разнообразия. Метод низкотемпературного замораживания спермы трутней решает задачи по сохранению генетических ресурсов медоносной пчелы и необходим для проведения селекционно-генетических исследований. В практическом пчеловодстве существует потребность в разработке технологии консервирования спермы трутней в условиях положительных температур без криоконсервации, с целью круглогодичного искусственного осеменения пчелиных маток. Но на сегодняшний день, медоносная пчела —  единственный объект, для которого эти методы находятся на стадии экспериментальной разработки. В данной статье приводятся результаты исследований по краткосрочному хранению спермы трутней медоносной пчелы при положительных температурах. Дана сравнительная оценка способам хранения спермы, разбавленной  в питательной среде и неразбавленной с использованием противомикробных средств. Контрольные и опытные образцы спермы исследовались по истечении 30 и 60 сут хранения с использованием методик оценки качества спермы и физиологических показателей искусственно осемененных маток. В ходе исследования оценивали: концентрацию сперматозоидов в семяприемнике маток с помощью счетной камеры Горяева, жизнеспособность сперматозоидов методами суправитального окрашивания трипановой синью и флуоресцентной микроскопии с использованием ДНК-красителей Hoechst, PI. По результатам исследований 73% жизнеспособных сперматозоидов обнаружено в образце с препаратом Метрогил Дента после 60 сут хранения при 24-26 ⁰С. Образцы с нативной спермой обладали жизнеспособностью 95% после охлаждения при 3 ⁰С в течение 60 сут без средств бактериальной контаминации. Oпределена возможность сохранения спермы трутней в течение 2 мес в безбелковой среде Insect-XPRESS^TM (рН 6,1).

PROSPECTS FOR SHORT-TERM SPERM STORAGE OF HONEYBEE DRONES

A. GULOV ¹, E. LARKINA ²

Abstract. Preserving the sperm of honeybee drones in combination with instrumental insemination of queen bees is an effective strategy for the conservation of species and their genetic diversity. The method of low-temperature freezing of sperm drones solves the problem of preserving the genetic resources of honeybee and is necessary for selection and genetic research. In practical beekeeping, there is a need to develop a technology for the drone semen of preserving at positive temperatures without cryopreservation, with the aim of year-round artificial insemination of queen bees. But today, honeybee is the only object for which these methods are at the stage of experimental development. This article presents the results of studies on the short-term storage at positive temperatures of honeybee drones of the sperm. A comparative assessment of diluted sperm in nutrient medium and undiluted using antimicrobial agents is given of the methods of storage. Control and experimental samples of the sperm were examined after 30 and 60 days of storage using methods for assessing the drone semen quality and physiological parameters of artificially inseminated honeybee queens. The study evaluated: the number of spermatozoa entering the spermatheca of queen bee by counting the Goryaev camera, the viability of spermatozoa by the methods of supravital staining of trypan blue and fluorescence microscopy using DNA dyes Hoechst, PI. According to the results of studies, in the sample with Metrogyl dent after 60 days of storage at 24-26 ⁰C were found 73% of viable spermatozoa. After cooling at 3 ° C for 60 days, the native spermatozoa samples without a means of bacterial contamination had a viability of 95%. The drones semen saving for 2 months in a protein-free environment Insect-XPRESS^TM (pH 6.1) of the possibility.

¹ ФГБНУ “ФНЦ пчеловодства”; 391110, Россия, Рязанская обл., г. Рыбное, ул. Почтовая, 22;

² ФГБОУ ВО «Рязанский государственный университет им. С.А. Есенина»; 390000, Россия, Рязанская обл., г. Рязань, ул. Свободы, д. 46.