Лаборатория молекулярной генетики
Исследование генома сельскохозяйственных животных было начато в 1965 году с приходом в аспирантуру А. Ф. Яковлева, в кандидатской диссертации которого была выявлена интенсивность включения радиоактивных предшественников синтеза ДНК во фракции различной молекулярной массы, полученные с помощью жидкостной хроматографии, с последующим определением степени дестабилизации вторичной структуры этих фракций. Было подтверждено положение о высоком включении импульсной метки во фрагменты ДНК размером 200-400 нуклеотидных пар, которые демонстрируют более низкую стабильность структуры, чем высокополимерные фрагменты ДНК. Это была одной из первых разработок по молекулярной биологии сельскохозяйственных животных в СССР. Приказом директора от 2 августа 1972 года в институте создано первое научное подразделение по молекулярной биологии сельскохозяйственных животных в СССР – лаборатория молекулярной генетики, которую возглавил кандидат биологических А. Ф. Яковлев.
Научный сотрудник Л.В.Козикова ставит методы приготовления препаратов хромосом и авторадиографии. В течение нескольких лет коллектив лаборатории детально исследует скорость синтеза ДНК в различных районах хромосом коров (А. К. Носач.), свиней (В. Г. Бавин) и птиц (Л. В. Козикова) в процессе S-периода клеточного цикла. Было установлено, что синтез ДНК хромосом идет асинхронно, в первой половине S-периода синтезируется эухроматин, обогащенный структурными генами, а затем – гетерохроматин. Весь процесс репродукции хромосом протекает в автоматическом режиме и надежно защищен от возможных ошибок
В связи с необходимостью кариотипического анализа сельскохозяйственных животных с целью поиска хромосомных нарушений в течение нескольких лет разрабатывали стандарты кариотипов животных и птиц. Большое внимание было уделено совершенствованию методологии идентификации хромосом на основе использования дифференциального окрашивания и цитохимического анализа (А. В. Родионов, Н. А. Курчанов, Ю. А. Эрматов). Для точной идентификации хромосом на основе использования дифференциального окрашивания возникла потребность в микроденситометрии негативных изображений хромосом. Совместно с Конструкторским бюро АМН СССР был сконструирован и изготовлен телевизионный анализатор микрообъектов, способный автоматизировать эту работу С использование этого прибора были разработаны карты G-окрашенных хромосом коров (Носач А. К., Козикова Л. В., Яковлев А. Ф., Цитология и генетика, 1977,11,2). Позднее было осуществлено цитогенетическое картирование прометафазных хромосом коров путем количественного анализа RBA-окрашивания (Чиряева О. Г. и др., Генетика, 1989, 25,8). Результаты этих разработок позволили в дальнейшем вести разработку способов диагностики хромосомных аберраций и внедрить их в селекционную практику.
В кариологическом анализе птиц имелась проблема подсчета микрохромосом, число которых на разных препаратах существенно варьировало. Исследованием взаимосвязи степени спирализации и числа микрохромосом на препаратах было установлено, что причиной картины непостоянства числа хромосом является асинхронная спирализация микрохромосом, влияющая, вероятно, на связывание структуры микрохромосом с красителем (Л. В. Козикова и др. Генетика, 1977, Х111, 5). Были предприняты исследования мейотических хромосом типа ламповых щеток, приготовленных из ооцитов птиц. Такие хромосомы по размерам в десятки раз превосходят митотические хромосомы. С помощью маркерных петель были не только разработаны цитологические карты хромосом, но и картированы при помощи гибридизации in situ клонированные последовательности ДНК с последующей оценкой их транскрипции. Была проведена оценка частоты возникновения хиазм и определена частота рекомбинаций в микрохромосомах. Разработанные цитологические и генетические карты микрохромосом типа ламповых щеток кур могут быть использованы для картировании генов, изучения их транскрипции на стадии оогенеза и для выявления изменений их структуры (Л. А. Челышева, А. В. Родионов и др. Цитология, 1990,31.№4).
В начале 70-х годов появились сведения о влиянии хромосомных перестроек, в частности центрических слияний и реципрокных транслокаций, на воспроизводительные и другие качества сельскохозяйственных животных. Эта проблема была поставлена перед племенными службами страны и озвучена через научную печать (Яковлев А. Ф. Сельскохозяйственная биология, 1980, №3). Первые же исследования показали, что транслокация 1/29 у симментальского скота встречается с высокой частотой – от 5 до 40 % (А. Ф. Яковлев, А. И. Жигачев, Н. С. Никитин, А. К. Носач, А. Н. Курчанов, В. А. Черкасов. Молочное и мясное скотоводство,1982, №2). Были организованы производственные лаборатории с обучением персонала и проведено в масштабах страны обследование различных пород коров с выбраковкой в первую очередь быков производителей, которые несли скрытые генетические дефекты. Основное внимание было уделено симментальской породе крупного рогатого скота и породам, в формировании которых участвовал симменталы. Разработанные методические рекомендации по цитогенетическому контролю быков производителей были одобрены МСХ СССР и внедрены в практику. Участникам этой разработки была присуждена Премия Совета Министров СССР.
Количественной оценке числа, локализации на хромосомах и размера ядрышковых организаторов у коров (Т. Ю. Киселева, А. Ф. Яковлев, Сельскохозяйственная биология ,1985, №4) и свиней (В. Н. Стефанова, А. Ф. Яковлев, Доклады ВАСХНИЛ, 1983, №5) посвящены детальные исследования, которые были оформлены в виде кандидатских диссертаций. Полученные исходные параметры в дальнейшем были использованы в более углубленном изучении структурных изменений хромосом, вызываемых деконденсирующими агентами и маркирования генома свиней с помощью микродессекции хромосом (Стефанова В. Н. Цитология 2006, 48,9).
Лаборатория молекулярной цитогенетики в 1980 году. Первый ряд слева на право:
Ст. лаборант З. С. Савенкова, к.б.н. А. К. Носач, к.б.н. , к.б.н./ зав.лаборатории А. Ф. Яковлев (ныне д.б.н., проф., член-корреспондент РАСХН), к.б.н. А. В. Родионов, (ныне д.б.н., проф.) Т. В. Кузнецова (ныне д.б.н.); второй ряд : ст.лаборант Л. А. Курбатова, ст. инженер Г. И. Серебряков, к.б.н. Л. В. Козикова (ныне д.б.н.), ст.лаборант Р. С. Евсикова, научный сотрудник Л. И. Петрова, к.б.н. В. Н. Стефанова , к.б.н. В. Г. Бавин
В середине 80-х годов проведены оригинальные исследования синаптонемных комплексов спермиев быков и проведено разделение спермиев по полу , т.е. несущих Х- и Y- хромосомы (Т. В. Кузнецова и др., Онтогенез, 1986, 16, №4). Это одна из первых работ, открывающая возможность анализа хромосом спермиев и разработки препаративного (при помощи сортировщика проточного цитометра) разделения спермиев по полу, которое сейчас уже практикуется в племенной работе.
Полученные сведения о структуре генома животных и, в частности, о наличии повторяющихся последовательностей ДНК, которые подвержены мутационным воздействиям, позволили приступить к исследованию генетического разнообразия и дивергенции видов и пород сельскохозяйственных животных. На первом этапе в институте определили содержание повторяющихся последовательностей ДНК в геноме различных пород кур. Затем был модифицирован флуориметрический способ оценки термостабильности реассоциированных гибридных дуплексов ДНК и появилась возможность определять степень дивергенции между различными геномами. Были открыты в геноме дикого кабана и домашней свиньи «ископаемые» повторы ДНК, имеющие весьма древнее происхождение и начата работа по определению дивергенции различных пород кур (В. П. Терлецкий, Сельскохозяйственная биология 1985, №4).
Исследование первичной структуры митохондриальной ДНК американской норки позволило разработать физическую и генетическую карты митохондриального генома и провести анализ генетической дивергенции семейства куницеобразных (С. А. Коваленко и др., Доклады РАСХН,1999, №2).
Освоение методов фингерпринтинга ДНК и полимеразной цепной реакции (ПЦР) значительно расширило возможности анализа генетической гетерогенности различных видов и пород животных. Исследование частоты аллелей, гетерозиготности , генетических расстояний при помощи статистических методов позволило выявить закономерности формирования генетического разнообразия и разработать рекомендации для разведения малых генофондных популяций овец, коз и птиц, выявить генетические взаимоотношения между различными породами и популяциями сельскохозяйственных животных. Особое значение приобрела оценка полиморфизма минисателлитных ДНК, которые имеют высокую скорость мутаций, что позволило с высокой точностью количественно определять дивергенцию пород и популяций.
Были определены породные и популяционные маркеры у крупного рогатого скота, оленей, овец, коз, кур, осетровых и лососевых рыб, изучена филогения этих видов животных. В порядке международного сотрудничества с научными институтами Финляндии и других стран проведен широкомасштабный анализ по 30 микросателлитным маркерам 51 локальных пород и популяций крупного рогатого скота. Статистический анализ частоты микросателлитных маркеров, наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности, числа эффективных аллелей на локус, коэффициента инбридинга, информативности локусов, вносящих основной вклад в показатели гетеро- и гомозиготности, – это далеко не полный перечень изучаемых признаков, позволил детально охарактеризовать особенности генетической структуры нескольких десятков пород крупного рогатого скота (Т.Ю.Киселева и др.,2006, Genet.Sel.Evol.,38; 2007, Molecular Ecology, 16).
Известно, что для бройлерной технологии важное значение имеет однородность стада. При этом недостаточно просто иметь стадо однородное по живой массе в определенном возрасте, однородным так же должно быть развитие. Все эти требования находятся в прямом противоречии с поддержкой достаточного разнообразия популяций, которое бы облегчало формирование генетического прогресса. В данной ситуации изучение генетического разнообразия в бройлерном птицеводстве на основе анализа полиморфизма ДНК помогает осуществлять контроль и поддерживать генетическую гетерогенность на желаемом уровне. На основе анализа полиморфизма ДНК выявлены особенности генетической организации исходных форм, используемых в создании кросса «Смена 7», и оценено влияние этих особенностей на популяционно-генетические параметры в конечных формах в процессе скрещиваний. Выявлена возможность селекции на скорость роста с использованием маркерных фрагментов микросателлитов ДНК. Обоснование эффективности использования анализа микросателлитов ДНК дает надежный инструмент в руки селекционеров для контроля генетического разнообразия в бройлерном птицеводстве (В. И. Тыщенко, Н. В. Дементьева, О. В. Митрофанова, Э. А. Сексте, В. П. Терлецкий, А. Ф. Яковлев, Сельскохозяйственная биология, 2007, №4).
В Экспериментальном хозяйстве института в течение многих лет проводили направленный отбор в различных популяциях птиц. Селекция на устойчивость к пониженным температурам и отбор по потенциальным резервам надпочечника позволили получить интересный селекционный материал. Изучение полученного и исходного поголовья с использованием фингерпринтинга показало существенную дивергенцию популяций в процессе такой селекции.
Выявлены маркерные фрагменты у различных породных групп форелевых рыб, что позволяет проводить генетическую паспортизацию форелевых рыб на предмет принадлежности выборки особей к определенной группе. В промышленном рыбоводстве это имеет большое значение, так как в раннем возрасте молодь всех пород по фенотипическим признакам различить очень трудно. Анализ генетических локусов в геноме радужной форели и стальноголового лосося позволил выявить связь между скоростью роста форели и аллельными вариантами изучаемых локусов. Выявлены ДНК-маркеры, у которых имеется выраженный фенотипический эффект на массу тела форели и стальноголового лосося (А. Ф. Яковлев, В. П. Терлецкий, Н. В. Дементьева, В. И. Тыщенко, Russian Agricultural Sciences, 2009, 35, № 5). При помощи RAPD- PCR- была изучена дивергенция между онежским, балтийским и каспийским лососем. Обнаружены маркерные фрагменты ДНК, которые позволяют контролировать процесс гибридизации между этими породами (Э. А. Сексте и др. Доклады РАСХН, 2008, 1). Исследования нестабильности кариотипа привели к совершенствованию микроядерного теста, в который были включены показатели частоты аномальных ядер, мостов и «хвостатых» ядер. Было показано, что спонтанная кариотипическая нестабильность обусловлена как факторами внешней среды, так и наследственностью. Зарегистрирована положительная корреляция между кариотипической нестабильностью и опухолевой злокачественностью клеток (В. Ю. Кравцов, А. Ф. Яковлев и др. Вопросы онкологии, 1992,38,10). Искусственное повышение такой нестабильности приводит к репродуктивной гибели клеток. Эти результаты открывают возможность разработки новых подходов к определению состояния опухолевых клеток и к контролю химиотерапии (В. Ю. Кравцов, и др. Cytogenet Cell Genet. 1997, 77, №1-2). Была обнаружена связь частоты аномальных ядер в лимфоцитах и заболеванием лейкозом у крупного рогатого скота (М. В. Тюкачева, Даклады РАСХН, 1996,№4). Исследование частоты микроядер и аномалий ядер лимфоцитов крупного рогатого скота in vitro с использованием цитохолозинового блока еще выше подняло разрешающую способность метода (С. Н. Прошин и др. Доклады РАСХН,2000, №6). При помощи разработанного метода было сделано важное открытие возможности селекции живых объектов на пониженную и повышенную дестабилизацию генома (В. Ю. Кравцов, С. Н. Прошин, А. Ф. Яковлев Способ селекции, Патент РФ N 2111249, 1998,; Генетика, 1998,34,1). В дальнейшем используемый комплекс приемов был адаптирован для генетического скрининга млекопитающих и рыб (А. Ф. Кравцов, А. Ф. Яковлев Патент РФ №214674, 1998), цитогенетической оценки опухолевых клеток (Патент 2182674, 1999) и для экспресс выявления облученных пациентов с повышенными частотами хромосомных аберраций (Патент РФ №2141558, 1997). Использование этих разработок позволило внедрить генетический скрининг для определения состояния рыбных ресурсов Каспийского моря, генофонда крупного рогатого скота, оленей и птиц (М. В. Тюкачева, Г. П. Косякова, С. Н. Прошин, Генетика, 1998,34). Особенно полезной оказалась разработанная технология для генетического скрининга облученных пациентов, принимавших участие в ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС (Е. В. Старкова и др.Cytogenet.Cell Genet., 1997,77, В. Ю. Кравцов и др. Генетика, 1997,33,12). Со времени случившейся аварии ведутся исследования частоты и спектра аберраций хромосом крупного рогатого скота, который находился в момент аварии рядом со станцией, а также потомков этих животных. Основным исполнителем этих исследований Т. Ю. Киселевой (Генетика, 1994, 30) было установлено, что со временем спектр хромосомных нарушений сужается, а частота их снижается. Однако, через несколько лет после аварии обнаруживаются реципрокные транслокации хромосом и даже транслокации ядрышкового организатора на другую хромосому и не в район теломеры, где они локализованы в нормальном состоянии. К используемым приемам определения степени дестабилизации генома был подключен метод Comet assay, позволяющий проводить электрофорез отдельных клеток, в частности спермиев, на предмет нарушения целостности ДНК. Так, было определено влияние длительного хранения спермиев и различных технологий криоконсервации спермы на целостность ДНК (С. Н. Прошин и др. Tissue and Cell Biology, 2007, l2, N.1).
До сего времени диагностика лейкоза крупного рогатого скота остается до конца не решенной проблемой. Была сделана попытка связать активность ядерного антигена клеточной пролиферации с заболеваемостью лейкозом. Иммуноцитохимический анализ на ядерный антиген клеточной пролиферации показал, что в среднем частота клеток, положительных на иммуноцитохимическое окрашивание в группе здоровых коров было в 10 раз ниже, чем у больных. Это дало возможность рекомендовать этот тест в качестве дополнительного диагностического теста (Г. П. Косякова, С. Н. Прошин, В. Ю. Кравцов, А. Ф. Яковлев Цитология. 2007, 49, №.9).
В конце 80-х годов институт начал разрабатывать подходы к генотипированию племенных животных, т.е. оценивать полиморфизм отдельных генов, существенно влияющих на количественные признаки и качество продукции. Работа была начата с изучения полиморфизма гена каппа-казеина. Реконструирование аминокислотных остатков в нуклеотидные последовательности дало возможность найти сайты рестрикции для определенных рестриктаз и оптимизировать условия для постановки ПЦР (А. Ю. Маркарян и др., Известия СО АН СССР, 1989, №2). В первой половине 90-х годов была выявлена частота генетических вариантов каппа-казеина, бета-лактоглобулина и генетического дефекта BLAD среди быков-производителей ООО «Невское» по племенной работе. Определение доли гетерозиготных особей дало возможность обнаружить нарушение генетического равновесия по типу «В» гена каппа-казеина. В дальнейшем генотипирование быков-производителей по полиморфизму ряда генов и генетических дефектов, как CVM, BLAD и DUMPS, стало обязательным. Были заключены Государственные контракты и появилась возможность проверки быкопроизводящих коров (А. Ф. Яковлев, В. П. Терлецкий, О. В. Митрофанова, Н. В. Дементьева, Молочное и мясное скотоводство, 2004, №6). Необходимо отметить, что в связи с развитием трансплантации эмбрионов были поставлены методы идентификации генетических вариантов локусов каппа-казеина и определение пола предимплатационных эмбрионов (С. Ю. Медведев и др., Доклады РАСХН, 1998,2). В настоящее время проводится генотипирование всех быков производителей и части быкопроизводящих коров на носительство генетических дефектов и типы генов каппа-казеина. Все сведения о результатах генотипирования представляются в племенные хозяйства. Разработаны «Рекомендации по использованию ДНК-технологии для элиминации скрытых генетических дефектов и определения аллелей гена каппа-казеина в молочном скотоводстве», которые внедрены в селекционную практику.
В 1990 году лаборатория молекулярной генетики была разделена на две лаборатории – лабораторию молекулярной цитогенетики (руководитель А. Ф. Яковлев) и лабораторию молекулярной организации генома (руководитель А. Ф. Смирнов). В лабораториях ведется тщательный отбор в аспирантуру. Подготовлено около 40 кандидатов биологических наук и 6 докторов наук. Среди выпускников аспирантуры лаборатории молекулярной цитогенетики имеются видные специалисты. Профессор А.В.Родионов заведует лабораторий цитогенетики Института ботаники РАН, доктор биологических наук В. Ю. Кравцов заведует лабораторией цитологии Всероссийского центра экстренной и радиационной медицины МЧС, доктор биологических наук А. Г. Авакова заведует отделом птицеводства Северо-Кавказского НИИ животноводства, доктор медицинских наук С. Н. Прошин является профессором кафедры фармакологии Северо-Западного государственного медицинского университета им. И. И. Мечникова, доктор биологических наук Т. В. Кузнецова является ведущим научным сотрудником НИИ акушерства и гинекологии РАМН, доктор биологических наук И. К. Мицикейне заведует лабораторией молекулярной генетики Ветеринарной Академии в Каунасе (Латвия), доктор медицины А. В. Рыбушкин является ведущим научным сотрудником отдела генетики Университета в Генте (Бельгия). Ряд выпускников аспирантуры работают в ведущих научных учреждениях США, Японии, Австралии и Австрии. По результатам исследований опубликовано более 700 работ, в том числе ряд публикаций в международных рецензируемых научных журналах.
Была создана методологическая база для создания одного из важнейших направлений биотехнологии – трансгенеза. В начале семидесятых годов прошлого столетия появилась идея осуществления работ по генетической инженерии не только на микробиологических объектах, но и на высших животных. В институте начали разработки молекулярных предпосылок к осуществлению генетической трансформации у высших животных. Была определена специфичность включения экзогенной ДНК в ядра и митохондрии органов кур с помощью использования авторадиографии и биохимических методов (Яковлев А. Ф., Шинкарева В. П., Доклады ВАСХНИЛ,1976 №9), подтверждена идея о возможности включения полимерной ДНК в геном клеток животных. В порядке выполнения этой тематики была показана возможность включения экзогенной АТФ в сперматозоиды хряка с помощью Н-1 гистона (Суродеева Е. К., Шинкарева В. П., Яковлев А. Ф., Ашмарин И. П., Цитология, 1975, 15, 11).
Важным этапом проведения исследований в этом направлении, но на уровне целых организмов служили опыты по искусственному переносу экзогенной ДНК в клетки. Отдел генетики и биотехнологии института является пионером в проведении работ по переносу генетического материала у сельскохозяйственных животных. Было показано, что при внутрибрюшинном введении тотальной меченой ДНК, часть материала экзогенной ДНК кур включается в разные периоды синтеза ДНК в хромосомы и не вырезается репарационными системами клетки (Яковлев А. Ф., Шинкарева В. П., Доклады ВАСХНИЛ, 1975, 3). В институте совместно с Институтом молекулярной генетики (Москва) исследования по получению и изучению трансгенных животных на основе новых технологий начались в 1987 году, открывая новую эру в биотехнологии сельскохозяйственных животных в России. У истоков первых успешных результатов получения трансгенных животных стояли К. Г. Газарян (ИМГ РАН), А. Ф. Яковлева, А. Ф. Смирнов, В. В. Тарантул, Н. В. Хайдарова, Л. В. Генинг, Ю. М. Кузнецов, Л. В. Козикова, А. М. Ефимов. Уже в 1987 году были получены трансгенные кролики и мыши, с перенесенным геном гормона роста быка (Молекулярная генетики, микробиология и вирусология, 1988, т.10, с.26-32). Получено 9 трансгенных мышей мышей, содержащих в геноме от 1 до 5 копий гена гормона роста быка. Одна мышь отличалась ускоренным ростом (50%). Из пяти потомков этой мыши 4 самца также имели ускоренный рост. Таким же путем было получено 3 трансгенных кролика с геном гормона роста быка.
Использование фрагментов ДНК некоторых онкогенных вирусов позволяет отбирать клоны трансформантов по изменению фенотипических признаков. В 1985 году Г. А. Дворянчиков сконструировал рекомбинантные ДНК, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие поверхностный антиген вируса гепатита человека (HBsAg), а также была создана плазмида на основе вектора с клонированной ДНК вируса бычьей папилломы. Эта бифункциональная плазмида способна реплицироваться как в клетках E.coli, так и в клетках животных, что было успешно продемонстрировано на клетках мышей линии 3T3 NIH и C127. При трансформации этих клеток происходило образование локальных очагов многослойного опухолевого роста (Г. А. Дворянчиков, А. Ф. Яковлев «Трансформация мышиных фибробластов клонированной ДНК вируса бычьей папилломы» Бюлл. ВНИИРГЖ. 1986, вып. 89, с.47-50). В клетках клонов-трансформантов ДНК вируса бычьей папилломы стабильно поддерживалась во внехромосомном состоянии на протяжении десятков клеточных генераций в количестве от 50 до несколько сотен копий на клетку (Г. А. Дворянчиков и др., Цитология 1987. №3. с.331-337). 1990 году были разработаны методические рекомендации по технологии получения трансгенных сельскохозяйственных животных (А. Ф. Яковлев, Л. В. Козикова, С. Ю. Медведев, В. Г. Бавин и др. «Использование приемов генетической инженерии для оценки и изменения генома сельскохозяйственных животных» Ленинград, 1990. с.11-22). Наиболее эффективные результаты в отделе генетики и биотехнологии были получены в конце прошлого столетия на кроликах и на свиньях (С. Ю. Медведев, Л. В. Козикова, В. Г. Бавин, А. Ф. Яковлев, Сельскохозяйственная Биология 1995. №6. С.43-48). В первой сериb опытов по переносу гена рилизинг фактора гормона роста был получен трансгенный кролик с низкой скоростью роста, которая передавалась потомкам. Во второй серии экспериментов получены трансгенные кролики, максимальная кратность превышения в весе которых была в 1.97 раза выше в возрасте 4 недели и в 1,2 раза в возрасте 18 недель. Проведены подобные эксперименты на свиньях и овцах.
Визуальные размеры трансгенного (справа) и нетрансгенного кроликов одного помета, с разной скоростью роста.
В конце восьмидесятых годов был заключен договор между РАСХН и Польской академией наук о проведении совместных исследований, в которых участвовали сотрудники Института генетики и разведения животных Польской академии наук и нашего института. Были проведены эксперименты по получению и изучению трансгенных кроликов с перенесенным геном релизинг фактора гормона роста. Получены животные с повышенной скоростью роста (С. Росохацкий, А. Ф. Смирнов, Л. В. Козикова, А. М. Ефимов, Д. Садовская. Animal Science Papers and Reports. 1992. №9).
С польскими коллегами было предпринято исследование экспрессии репортерных генов у предимплантационных зародышей сельскохозяйственных животных. Выявлено, что применение MAR-последовательностей даже в виде коинъекции приводит к увеличению выхода трансгенных эмбрионов.
В рамках совместной лаборатории в Институте животноводства г. Нитра, Словакия методом микроинъекции генов гормона роста быка (bGH) были получены трансгенные кролики с ускоренными темпами роста (Л. В. Козикова и др. 5th International symposium «Biological and technical intensification of production and increase of animal products quality» Nitra. Czechoslovakia. 1990).
В настоящее время проводятся исследования по трансгенезу на двух видах животных – курах и рыбах. В. Г. Бавин проводит исследования по получению трансгенных кур и петухов методом трансформации сперматозоидов с репортерным геном GFP и последующим искусственным осеменением кур. Л. В. Козикова проводит исследования на модельных объектах, которые представлены рыбы. В дальнейшем создание векторов, сочетающих репортерные гены и последовательности ДНК хозяйственно-полезных генов позволит уже на ранних этапах отбирать трансгенные эмбрионы нужного пола. Решение этих задач позволит поднять эффективность получения генетически-модифицированных животных. В конечном итоге планируется создать модельные объекты, такие как трансгенные птицы и трансгенные рыбы с экспрессией репортерных генов. с изученной динамикой и локализацией экспрессии репортерных генов, что позволит разработать методы более эффективного получения трансгенных животных с экспрессией заданных генов.